| 猪圆环病毒2型感染性克隆的构建 |
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| 引用本文： | 王伟丞,梁海英,曾智勇,汤德元,刘钊,代振江.猪圆环病毒2型感染性克隆的构建[J].畜牧与兽医,2015(3):84-87. |
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| 作者姓名： | 王伟丞 梁海英 曾智勇 汤德元 刘钊 代振江 |
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| 作者单位： | 贵州大学动物科学学院 |
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| 基金项目： | “携带遗传标记的猪圆环病毒反向遗传操作平台的构建”[黔科合LH字(2014)7670];贵州大学研究生创新基金项目“携带遗传标记的猪圆环病毒2型贵州株感染性克隆的构建”[研农2014016] |
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| 摘 要： | 为构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,采用PCR方法从已鉴定为PCV2阳性的病料中扩增PCV2全长基因组片段后将其定向克隆至PVAX1载体中,构建了PCV2感染性克隆质粒p VAX1-PCV2;将重组质粒转染细胞进行病毒拯救,通过免疫过氧化物酶和RT-PCR进行拯救病毒检测,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力和遗传稳定性。结果表明,构建的PCV2感染性克隆质粒,成功拯救出PCV2,拯救病毒盲传8代后毒价可达104.78TCID50/m L,体外增殖能力较为稳定。本试验为深入研究PCV2的基因功能及致病机制等奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 感染性克隆 病毒拯救 |
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