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山羊子宫内膜上皮细胞转染pCI—neo—hTERT质粒后的永生化
引用本文:吴庆侠,王爱华,司永嘉,周丽梅,盛宏霞,靳亚平.山羊子宫内膜上皮细胞转染pCI—neo—hTERT质粒后的永生化[J].兽医大学学报,2010(2):228-232.
作者姓名:吴庆侠  王爱华  司永嘉  周丽梅  盛宏霞  靳亚平
作者单位:[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 [2]西藏农牧学院动物科技学院,西藏林芝860000
基金项目:国家博士点基金资助项目(200807120022);西北农林科技大学青年骨干教师支持计划资助项目(04440305)
摘    要:为获得大量的、具有高度同一性和表型功能正常的山羊子宫内膜上皮细胞(EEC),本试验将含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达质粒pCI—neo—hTERT导入原代山羊EEC中,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定,利用免疫细胞化学方法检测hTERT导入后细胞端粒酶活性的表达情况,探讨转染后细胞的生长特性。结果显示,转染后获得的阳性克隆细胞及其传代细胞呈明显铺路石状。与原代细胞形态一致,具有接触抑制性;角蛋白检测阳性;细胞具有较高的端粒酶活性,目前已传至50代仍稳定增殖;100nmol/L的雌二醇(E2)可促进该细胞的增殖;50,100nmol/L的孕酮(P4)可明显抑制该细胞的增殖。这表明hTERT导入山羊EEC后,可使其重建端粒酶活性,从而获得大量的、具有高度同一性和表型正常的细胞。

关 键 词:山羊  子宫内膜上皮细胞  hTERT  端粒酶活性
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