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| 猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立 | |
| 引用本文： | 顾昀,周晓丽,袁秀芳,杜晓莉,徐丽华,李军星,方维焕,王一成.猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立[J].华北农学报,2015(1). |
| 作者姓名： | 顾昀 周晓丽 袁秀芳 杜晓莉 徐丽华 李军星 方维焕 王一成 |
| 作者单位： | 1. 浙江大学，浙江 杭州 310027; 浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所，浙江 杭州 310021 2. 浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州,310021 3. 浙江大学,浙江 杭州,310027 |
| 基金项目： | 浙江省三农六方项目(2012R22A60C01)；浙江省重大科技专项重点农业项目 |
| 摘 要： | 为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/m L,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2 h及4℃过夜。血清稀释度为1∶100;37℃作用45 min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪Ig G稀释度为1∶10 000,37℃温育60 min,底物显色37℃15 min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。 |
| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 重组N蛋白 ELISA |
Development of an Indirect ELISA Method for Detecting Antibody Against Porcine Epidemic Diarrhea Virus Based on Recombinant N Protein |
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| GU Yun,ZHOU Xiao-li,YUAN Xiu-fang,DU Xiao-li,XU Li-hua,LI Jun-xing,FANG Wei-huan,WANG Yi-cheng.Development of an Indirect ELISA Method for Detecting Antibody Against Porcine Epidemic Diarrhea Virus Based on Recombinant N Protein[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2015(1). | |
| Authors: | GU Yun ZHOU Xiao-li YUAN Xiu-fang DU Xiao-li XU Li-hua LI Jun-xing FANG Wei-huan WANG Yi-cheng |
| Abstract: | |
| Keywords: | Porcine epidemic diarrhea Recombinant N protein ELISA |
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