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| 奶牛乳房炎无乳链球菌的分离及PCR鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.甘肃农业大学动物医学院;2.甘肃农业大学生命科学技术学院 |
| 摘 要： | 利用THB(Todd-Hewitt Broth)固体培养基和色素试验培养基选择培养无乳链球菌,参照GenBank中无乳链球菌参考菌株(Accession:AF015927.1、JQ289582.1)16SrRNA和种属特异性基因cfb(CAMP因子)序列设计引物,对奶样中分离的12株疑似无乳链球菌进行鉴定。结果显示,经PCR扩增后,被检测的12株细菌均可扩增出预期大小的16S rRNA基因序列,而12株中有8株可以扩增出预期大小的cfb基因序列,条带单一,特异性好。序列BLAST显示,12株菌的16S rRNA基因序列与NCBI上报道的无乳链球菌相应序列高度同源(>99.0%),各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源(99.0%～100.0%);cfb基因序列与NCBI上已报道的无乳链球菌相应序列具有高度同源性(>99.0%),各菌株间cfb基因序列也高度同源(100.0%)。经选择培养与PCR鉴定结果可以确定12株疑似菌株中有8株为无乳链球菌。 |
| 关 键 词： | 奶牛乳房炎 无乳链球菌 PCR鉴定 16S rRNA cfb基因 |
Isolation and PCR-identification of Streptococcus agalactiaee in milk sampled from mastitic dairy cows |
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