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| H7亚型禽流感病毒核酸标准品制备及双探针荧光RT-PCR检测研究 | |
| 作者单位： | ;1.北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 摘 要： | 从禽流感病毒A/Chicken/1/2002(H7N1)核酸中扩增了完整HA的基因编码序列,克隆测序后,采用体外转录方法制备c RNA。用RNA保存液稀释至含量约108Copies/μL。分装后进行均匀性和稳定性检验,通过8家实验室联合定值,取平均值作为定值结果;经统计分析计算了该标准品的不确定度。此外,采用Taq Man方法,根据禽流感病毒H7亚型的血凝素基因的末端,采用1对引物和2条MGB探针,建立了禽流感病毒H7亚型Taq Man荧光RT-PCR快速检测技术。应用建立的方法对研制的标准品进行检测,检测限可达10基因拷贝;对新城疫病毒及其他亚型的流感病毒核酸进行检测,结果表明,建立的方法特异性良好,而且双探针的设计思路更能保证病毒核酸的有效检测,防止漏检。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 H7亚型 标准品 荧光RT-PCR |
Preparation of Reference Materials and Development of double probes Real-time RT-PCR for the Detection of Avian Influenza Virus Subtype H7 |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |