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| 牛分枝杆菌CFP-10和ESAT-6基因的融合表达及其抗原活性鉴定 | |
| 作者单位： | ;1.北京出入境检验检疫局;2.吉林农业大学动物科技学院;3.北京市农业局;4.四川省动物疫病预防控制中心 |
| 摘 要： | CFP-10和ESAT-6是牛分枝杆菌的免疫优势抗原,可诱导机体产生IFN-γ,在牛结核病的免疫诊断中发挥重要作用。本试验分别克隆了牛分枝杆菌CFP-10和ESAT-6基因,并将这2个基因融合扩增,构建重组表达质粒pET28a/CFP-10-ESAT-6,重组质粒在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达。重组蛋白主要以分泌表达的形式存在于表达上清中,收集上清中的目的蛋白进行Ni亲和层析柱和分子筛两步纯化,蛋白纯度分别达到90%和95%。将纯化的重组蛋白以2mg/L的质量浓度包被酶标反应板,用间接ELISA方法检测不同来源牛血清中的结核病抗体,结果表明,表达的重组融合蛋白具有良好的抗原活性,可有效识别阴、阳性结核病血清。 |
| 关 键 词： | CFP-10 ESAT-6 融合表达 抗原活性 |
Fusion expression of CFP-10 and ESAT-6 genes of Mycobacterium bovis and its antigenicity identification |
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