| 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和大肠杆菌二重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 聂培,易驰喆,贺婷,陈亚明,刘平,侯小露,杜玉兰,何宝祥.奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和大肠杆菌二重PCR检测方法的建立[J].广西畜牧兽医,2013(1):11-15. |
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| 作者姓名： | 聂培 易驰喆 贺婷 陈亚明 刘平 侯小露 杜玉兰 何宝祥 |
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| 作者单位： | 广西大学兽医内科学实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(批准号:30960294);广西科技攻关(桂科攻10100014-3);广西教改项目(编号GXTSZY141);广西大学大学生创新(SYJN20121714) |
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| 摘 要： | 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌。选取金黄色葡萄球菌的Nuc基因和大肠杆菌16S-23SrRNA基因作为扩增靶基因序列,设计两对特异性引物。通过正交试验优化反应条件建立二重PCR检测体系,优化结果表明二重PCR扩增出两条特异性条带,大小与实验设计的249bp(金黄色葡萄球菌)和375bp(大肠杆菌)相符,而对其它奶牛乳房炎主要病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出14.6pg的金黄色葡萄球菌模板和26.0pg的大肠杆菌模板。使用该二重PCR检测29份临床奶样,发现其中17份携带相关基因,并分离得到相关致病菌。
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| 关 键 词： | 二重PCR 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 |
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