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犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究
引用本文:乔军,夏咸柱,杨松涛,郝峰,高玉伟,郑晓一,黄耕.犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究[J].畜牧兽医学报,2006,37(4):412-416.
作者姓名:乔军  夏咸柱  杨松涛  郝峰  高玉伟  郑晓一  黄耕
作者单位:1. 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;塔里木大学动物科技学院,阿拉尔,843300
2. 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062
3. 791警犬基地,哈尔滨,150078
4. 吉林大学生命科学院,长春,130012
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30000123)
摘    要:以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCVDXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞,通过RT—PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36h后就可检测到目的基因的转录;在转染72h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。

关 键 词:犬冠状病毒  基因疫苗表达载体  构建  免疫原性
文章编号:0366-6964(2006)04-0412-05
收稿时间:2004-10-09
修稿时间:2004-10-09

Construction, Expression of Gene Vaccine Vectors of Canine Coronavirus and Its' Immunogenicity
QIAO Jun,XIA Xian-zhu,YANG Song-tao,HAO Feng,GAO Yu-wei,ZHENG Xiao-yi,HUANG Geng.Construction, Expression of Gene Vaccine Vectors of Canine Coronavirus and Its'' Immunogenicity[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2006,37(4):412-416.
Authors:QIAO Jun  XIA Xian-zhu  YANG Song-tao  HAO Feng  GAO Yu-wei  ZHENG Xiao-yi  HUANG Geng
Institution:1. Institute of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130062, China ;2. 791 Police Dog Base, Harbin 150078, China;3. Department of Animal Science and Technology , Tarim University, Alar 843300,China;4. College of Life Science, Jilin University, Changchun 130012, China
Abstract:
Keywords:canine coronavirus  gene vaccine vector  construction  immunogenicity
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