| 恩诺沙星单克隆抗体的制备及ciELISA试剂盒的研制 |
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| 引用本文： | 赵银丽,王建华,王自良.恩诺沙星单克隆抗体的制备及ciELISA试剂盒的研制[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2009,37(2):33-39. |
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| 作者姓名： | 赵银丽 王建华 王自良 |
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| 作者单位： | 赵银丽,ZHAO Yin-li(西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100;河南工业大学,生物工程学院,河南,郑州,450001);王建华,WANG Jian-hua(西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨凌,712100);王自良,WANG Zi-liang(河南省农业科学院,动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003);滕蔓,刘庆堂,邓瑞广,张改平,TENG Man,LIU Qing-tang,DENG Rui-guang,ZHANG Gai-ping(河南省农业科学院,动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002);范国英,FAN Guo-ying(河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003)
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| 摘 要： | 【目的】研制快速、灵敏、特异的恩诺沙星残留检测ciELISA试剂盒(ENR-Kit),为动物源性食品中恩诺沙星(ENR)残留的快速免疫学检测奠定基础。【方法】通过细胞融合技术制备恩诺沙星单克隆抗体(ENR mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法生产ENR单抗,应用ENR mAb研制ENR残留间接竞争ELISA(ciELISA)快速检测试剂盒,并对其灵敏度、半数抑制浓度(IC50)、特异性、准确度和基质效应性进行检测。【结果】筛选出2株杂交瘤细胞,其单抗亚类均为IgG1亚型。4G1-B3杂交瘤细胞株的ENR mAb间接ELISA效价为1∶1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/moL。ENR-Kit的线性检测范围为0.05~48.75μg/L,灵敏度0.05μg/L,半数抑制浓度(IC50)为1.31μg/L,与环丙沙星的交叉反应率(CR)为0.02%,与其他化合物的交叉反应率(CR)均<0.01%。ENR-Kit对牛奶样、鱼肉样和鸡肉样中ENR的平均添加回收率分别为96.49%,86.95%和84.13%,平均变异系数均<10%,不同基质对ENR-Kit检测结果影响小。【结论】研制的ENR-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合ENR残留快速检测的推广应用。
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| 关 键 词： | 恩诺沙星 杂交瘤细胞 单克隆抗体 ciELISA 快速检测试剂盒 |
| 收稿时间： | 2008/3/26 0:00:00 |
Preparation of monoclonal antibody and development of ciELISA kit for rapid detection of enrofloxacin |
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| ZHAO Yin-li,WANG Jian-hua,WANG Zi-liang,TENG Man,LIU Qing-tang,DENG Rui-guang,FAN Guo-ying,ZHANG Gai-ping.Preparation of monoclonal antibody and development of ciELISA kit for rapid detection of enrofloxacin[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2009,37(2):33-39. |
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| Authors: | ZHAO Yin-li WANG Jian-hua WANG Zi-liang TENG Man LIU Qing-tang DENG Rui-guang FAN Guo-ying ZHANG Gai-ping |
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| Institution: | 1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 College of Bioengineering,Henan University of Technology,Zhengzhou,He’nan 450001,China;3 The Provincial Key Laboratory of Animal Immunology,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou,He’nan 450002,China;4 College of Animal Sciences,Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang,He’nan 453003,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ciELISA |
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