| 一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法 |
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| 引用本文： | 王静毅,冯仁军,柴娟,陈友,张银东,马子龙,武耀廷.一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法[J].果树学报,2015(2):335-338. |
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| 作者姓名： | 王静毅 冯仁军 柴娟 陈友 张银东 马子龙 武耀廷 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所·农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;中国热带农业科学院航天育种研究中心;海南大学农学院;琼州大学 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(ITBB130201,1630052014006);海南省自然科学基金(312050,312051);国家自然科学基金(31201603);海南省重大科技项目子课题(ZDZX2013023-1) |
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| 摘 要： | 【目的】提供一种简单、经济、高效的香蕉小分子RNA提取方法,以满足RT-PCR、Northern杂交等分子生物学研究的需要。【方法】以巴西蕉(Musa acuminata L.AAA group,‘Brazilian’)的叶片、雄花、果实和根系为材料,利用改良的CTAB法,结合使用PEG8000分级沉淀DNA和大分子RNA,从而获得小分子RNA。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示小RNA带型清晰,无DNA和大分子RNA干扰,说明小RNA质量较好。获得的小RNA经紫外光谱分析其A260/A280的比值在1.872~2.020,产量可达35μg·g-1。以提取的各组织小分子RNA为模板,利用茎环RT-PCR方法在香蕉不同组织小RNA中均检测到mi RNA156a,其扩增片断大小约为70 bp,且测序结果与预测的香蕉mi R156a序列一致。【结论】本实验提供了一种简便高效的香蕉小分子RNA提取方法,可满足RT-PCR、Northern blotting及小RNA文库构建等后续分子生物学研究的需要,为研究人员在实际工作中提供了更多的选择。
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| 关 键 词： | 香蕉 小分子RNA 提取 |
A simple and efficient method for isolating small RNAs from banana(Musa nana L.) |
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| WANG Jingyi;FENG Renjun;CHAI Juan;CHEN You;ZHANG Yindong;MA Zilong;WU Yaoting.A simple and efficient method for isolating small RNAs from banana(Musa nana L.)[J].Journal of Fruit Science,2015(2):335-338. |
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| Authors: | WANG Jingyi;FENG Renjun;CHAI Juan;CHEN You;ZHANG Yindong;MA Zilong;WU Yaoting |
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| Institution: | WANG Jingyi;FENG Renjun;CHAI Juan;CHEN You;ZHANG Yindong;MA Zilong;WU Yaoting;Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Tropical Crops,Ministry of Agriculture,Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences(CATAS);Space Breeding Research Center,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences;Agricultural collage of Hainan University;Qiongzhou university; |
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