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猪IGF-Ⅰ mRNA实时荧光定量PCR定量标准的构建
引用本文:肖书奇,张嘉保,张树敏,赵志辉,刘保国,李爽,戴立胜,赵中利,李毅,高妍.猪IGF-Ⅰ mRNA实时荧光定量PCR定量标准的构建[J].广西农业生物科学,2006,25(Z1):10-14.
作者姓名:肖书奇  张嘉保  张树敏  赵志辉  刘保国  李爽  戴立胜  赵中利  李毅  高妍
作者单位:1. 吉林大学,实验动物中心,吉林,长春,130062
2. 吉林省农业科学院,吉林,公主岭,136100
3. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
4. 河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003
基金项目:国家振兴东北老工业基地科技攻关项目
摘    要:采用RT-PCR的方法利用肝组织提取的总RNA制备猪胰岛素样生长因子Ⅰ(pIGF-Ⅰ)cDNA目的片断,与pMD-18T vector连接成重组质粒,并转化Escherichia coli DH5α.联合应用PCR鉴定、α互补法、限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备实时荧光定量PCR(FQ-PCR)梯度浓度参考标准.结果表明:pIGF-Ⅰ cDNA目的片断成功制备,并获得稳定的重组质粒,保持了目的片断序列的特异性和完整性,成功构建了pIGF-Ⅰ实时FQ-PCR的定量参考标准.

关 键 词:  胰岛素样生长因子Ⅰ  参考标准
文章编号:1008-3464(2006)增-0010-05
修稿时间:2006年8月13日

Construction of the standards for detecting pig IGF-Ⅰ mRNA with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction
XIAO Shu-qi,ZHANG Jia-bao,ZHANG Shu-min,ZHAO Zhi-hui,LIU Bao-guo,LI Shuang,DAI Li-sheng,ZHAO Zhong-li,LI Yi,GAO Yan.Construction of the standards for detecting pig IGF-Ⅰ mRNA with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction[J].Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science,2006,25(Z1):10-14.
Authors:XIAO Shu-qi  ZHANG Jia-bao  ZHANG Shu-min  ZHAO Zhi-hui  LIU Bao-guo  LI Shuang  DAI Li-sheng  ZHAO Zhong-li  LI Yi  GAO Yan
Abstract:
Keywords:
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