| 鸡白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 李新生,尹红征,陈红英,邵攀峰,王振亚,宋亚鹏.鸡白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].安徽农业大学学报,2009,36(4). |
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| 作者姓名： | 李新生 尹红征 陈红英 邵攀峰 王振亚 宋亚鹏 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
2. 河南农业大学信息与管理科学学院,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑计划专项 |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR技术直接从罗曼鸡脾脏提取的总RNA中扩增鸡白细胞介素IS(ChlL-18)全基因,并克隆和测序得到序列基因全长为597 bp的ChIL-18.将ChIL-18成熟蛋白编码区(510 bp)定向插入到原核表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建重组表达质粒pGEX-ChIL-18,转化大肠杆菌B121(DE3),在IPTG诱导下可高效表达融合蛋白(GST-ChIL-18).SDS-PAGE可检测到分子质量约为46 kDa的GST-ChIL-18.Western blot证实GST-ChIL-18能与鸡IL-18单克隆抗体发生特异性反应.融合蛋白GST-ChIL-18经谷胱苷肽Seph-arose-4B亲和柱层析纯化后明显促进鸡T淋巴细胞转化,表明所表达的ChIL-18具有一定的生物活性.
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| 关 键 词： | 鸡白细胞介素18 成熟蛋白 克隆 原核表达 |
Gene cloning and mature protein expression of chicken interleukin-18 in Escherichia coli |
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