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猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的真核表达质粒的构建及表达分析
引用本文:赵光辉,鲁琨,张改平,宁长申,王选年,张龙现,菅复春,宋海涛.猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的真核表达质粒的构建及表达分析[J].河南农业大学学报,2009,43(2).
作者姓名:赵光辉  鲁琨  张改平  宁长申  王选年  张龙现  菅复春  宋海涛
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省农业科学院河南省动物免疫重点实验室,河南,郑州,450002;华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642
2. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省农业科学院河南省动物免疫重点实验室,河南,郑州,450002
3. 河南省农业科学院河南省动物免疫重点实验室,河南,郑州,450002
4. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002
5. 河南省农业科学院河南省动物免疫重点实验室,河南,郑州,450002;河南科技学院动物科学学院,河南,新乡,453003
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列,从pMDM13h中扩增带酶切位点和His-tag的基因序列;用HindⅢ和Xho Ⅰ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3.0栽体,连接构建真核表达重组质粒Pc3M13h,利用PCR,双酶切和测序鉴定其正确性;重组质粒pe3M13h转染COS-7细胞,瞬时表达的转染细胞(96孔板)在转染36~48 h后,应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学,分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达.结果表明,设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和His-tag的基因序列;成功构建了真核表达重组质粒pe3M13,双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学检测显示,pc3M13h重组质粒不但能够在COS-7细胞中进行表达,而且能够进行微量的分泌表达.

关 键 词:猪囊尾蚴  排泄分泌抗原  基因表达

Construction and expression of eukaryotic expression vector containing M13h ES antigen gene of Cysticercus cellulosae
ZHAO Guang-hui,LU Kun,ZHANG Gai-ping,NING Chang-shen,WANG Xuan-nian,ZHANG Long-xian,JIAN Fu-chun,SONG Hai-tao.Construction and expression of eukaryotic expression vector containing M13h ES antigen gene of Cysticercus cellulosae[J].Journal of Henan Agricultural University,2009,43(2).
Authors:ZHAO Guang-hui  LU Kun  ZHANG Gai-ping  NING Chang-shen  WANG Xuan-nian  ZHANG Long-xian  JIAN Fu-chun  SONG Hai-tao
Abstract:
Keywords:Cysticercus cellulosae  ES antigen  gene expression  
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