| 摘 要： | 【目的】构建ggamiRNA155前体基因（preggamiRNA155）真核过表达载体，验证ggamiRNA155在MDCMSB1细胞中的表达效果，探究其对MDCCMSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增ggamiRNA155前体基因片段preggamiRNA155，并将其克隆入pMD 18T载体，构建克隆载体pMD18TpreggamiRNA155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2GW/EmGFPmiRNA真核表达载体和pMD18TpreggamiRNA155，preggamiRNA155酶切回收片段与pcDNA6.2GW/EmGFPmiRNA的酶切回收片段进行连接，构建重组真核表达载体pcDNA6.2preggamiRNA155，对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCCMSB1细胞中，应用实时荧光定量PCR ( Realtime PCR )检测ggamiRNA155的表达水平，利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154 bp的鸡preggamiRNA155基因。成功构建了preggamiRNA155的真核表达载体pcDNA6.2preggamiRNA155，瞬时转染MDCCMSB1细胞后ggamiRNA155表达水平显著增加，且MDCCMSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了preggamiRNA155的真核表达载体，其可在MDCCMSB1细胞中过表达ggamiRNA155，且可促进MDCCMSB1细胞的体外增殖。
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