| 蜂房蜜蜂球菌环介导等温扩增检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 段进刚,陈建豪,杨荣荣,马春江.蜂房蜜蜂球菌环介导等温扩增检测方法的建立及应用[J].蜜蜂杂志,2020,40(9):1-8. |
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| 作者姓名： | 段进刚 陈建豪 杨荣荣 马春江 |
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| 作者单位： | 哈密市动物疫病预防控制中心,新疆哈密839000 |
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| 基金项目： | 自治区区域协同创新专项 |
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| 摘 要： | 为建立一种快速、灵敏的蜂房蜜蜂球菌(Me lissococcus p luton,MSP)的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测方法,针对蜂房蜜蜂球菌16S rRNA特异性序列设计6条特异性引物,分别对Mg2+、dNPTs、引物、甜菜碱浓度及条件进行优化,建立了欧洲蜜蜂幼虫腐臭病的LAMP检测方法,并对其特异性和灵敏性进行了检测.结果 显示,建立的LAMP检测方法具有很好的特异性,仅以蜂房蜜蜂球菌为模板可扩增出梯状条带,最低可检测到7.231×1 0拷贝/μL,是普通PCR的100倍,并且该方法快速简便、检测时间仅需0.5 h,肉眼即可观察检测结果.结果 表明,建立的LAMP检测方法可用于蜂房蜜蜂球菌的检疫,为基层快速诊断和预防该病提供了新的技术.
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| 关 键 词： | 环介导等温扩增 蜂房蜜蜂球菌 欧洲幼虫腐臭病 快速检测 |
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