α-银环蛇毒素融合基因表达载体的构建及原核表达 |
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引用本文: | 胡延春,张乃生,欧阳红生,柳增善,邓俊良.α-银环蛇毒素融合基因表达载体的构建及原核表达[J].畜牧与兽医,2008,40(4):7-10. |
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作者姓名: | 胡延春 张乃生 欧阳红生 柳增善 邓俊良 |
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作者单位: | 1. 四川农业大学动物医学院,四川,雅安,625014 2. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 |
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摘 要: | 设计并人工合成2条引物,对作者构建的重组质粒pMD-α-BGT进行PCR扩增获得α-BGT基因。将目的基因连接至pUCm-T载体构建克隆质粒pUCm-α-BGT。克隆质粒经BamHⅠ、NotⅠ双酶切后连接至融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,成功构建融合基因表达载体pGEX-α-BGT,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。表达产物经15%SDS-PAGE分析,在约34ku处可见明显的外源蛋白质表达带,与预计的分子量大小一致,其表达量约占细菌总蛋白的32.6%。Westernblotting和间接ELISA检测结果表明,α-BGT的融合表达蛋白与天然α-BGT标准品具有相似的抗原性。
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关 键 词: | α-银环蛇毒素 克隆表达 抗原性 |
文章编号: | 0529-5130(2008)04-0007-05 |
修稿时间: | 2007年7月13日 |
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