| 小麦原生质体的电激介导基因转移 |
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| 引用本文： | 李宏潮,町井博明.小麦原生质体的电激介导基因转移[J].华北农学报,1996,11(3):25-30. |
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| 作者姓名： | 李宏潮 町井博明 |
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| 作者单位： | 北京市植物细胞工程实验室，日本国立农业生物资源研究所 |
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| 摘 要： | 从小麦品种“Ｂｏｄａｌｉｎ”胚性悬浮细胞分离出原生质体，通过电激将质粒ＰＢＣ１ＤＮＡ（携带β－葡萄糖苷酸酶（ＧＵＳ）标记基因和潮霉素抗性基因ｈｐｈ）导入原生质体。采用ＢＴＸ电激系统和ＡＳＰ电激缓冲液，最佳电激条件为３００Ｖ（７５０Ｖ／ｃｍ）和５０ｍｓ（约１０００μＦ），转化的原生质体内ＧＵＳ的活性最高；质粒ＤＮＡ的有效使用浓度为２５μｇ／ｍｌ。电激处理后，原生质体培养２～３天，ＧＵＳ基因表达最强，宜于检测其瞬时表达；牛胸腺ＤＮＡ可协助提高ＧＵＳ基因的导入效果。质粒ＰＢＣ１ＤＮＡ处理的原生质体培养于添加潮霉素的ＫＭＰ培养基。经４个月抗性筛选，选择获得１５个潮霉素抗性克隆
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| 关 键 词： | 小麦 原生质体 电激 基因导入 潮霉素 抗性克隆 |
Gene Transformation of Wheat Protoplasts by Electroporation |
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| Li Hongchao,Hu Daofen.Gene Transformation of Wheat Protoplasts by Electroporation[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,1996,11(3):25-30. |
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| Authors: | Li Hongchao Hu Daofen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wheat protoplasts Electroporation Gene transfer GUS activity Hygromycin resistant callus |
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