| 柑橘大实蝇GSTd1基因的克隆、原核表达及重组蛋白GSTd1的酶学特征 |
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| 引用本文： | 刘毅,田晓丽,毛永娜,桂连友,王福莲,张国辉.柑橘大实蝇GSTd1基因的克隆、原核表达及重组蛋白GSTd1的酶学特征[J].植物保护学报,2023,50(5):1269-1279. |
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| 作者姓名： | 刘毅 田晓丽 毛永娜 桂连友 王福莲 张国辉 |
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| 作者单位： | 长江大学农学院, 长江大学昆虫研究所, 湖北 荆州 434025;长江大学生命科学学院, 湖北 荆州 434025;湖北省林业科学研究院荆州分院, 荆州 434020 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（31972274），湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队项目（T2022009） |
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| 摘 要： | 为深入研究柑橘大实蝇Bactrocera minax嗅觉系统中气味信号降解机制，对柑橘大实蝇头部转录组进行分析，筛选谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因，对其进行序列测定和分子生物学分析，利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在柑橘大实蝇成虫各组织中的表达模式，并对该基因进行克隆和原核表达，采用Western blot对获得的编码蛋白GSTd1进行检测，并分析该蛋白的酶学特征。结果显示，成功获得1条具有完整开放阅读框的GST基因，将其命名为GSTd1，该基因完整开放阅读框为624 bp，编码207个氨基酸残基，预测蛋白分子量为23.72 kD，等电点为6.16，无信号肽，不含跨膜结构域，属于胞质型GST蛋白。序列比对和系统进化树分析结果表明柑橘大实蝇GSTd1属于昆虫特有的GST蛋白的Delta亚家族成员。柑橘大实蝇GSTd1基因在柑橘大实蝇成虫触角中的相对表达量最高。柑橘大实蝇GSTd1重组蛋白具有催化其通用底物1-氯-2,4-二硝基苯(1-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)的能力，最大反应速度和米氏常数分别为...
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| 关 键 词： | 柑橘大实蝇 谷胱甘肽S-转移酶 原核表达 蛋白纯化 酶活力 |
| 收稿时间： | 2022/9/14 0:00:00 |
Cloning, prokaryotic expression of GSTd1 gene from Chinese citrus fruit fly Bactrocera minax and the enzymatic characteristics analysis of the recombinant GSTd1 protein |
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| Liu Yi,Tian Xiaoli,Mao Yongn,Gui Lianyou,Wang Fulian,Zhang Guohui.Cloning, prokaryotic expression of GSTd1 gene from Chinese citrus fruit fly Bactrocera minax and the enzymatic characteristics analysis of the recombinant GSTd1 protein[J].Acta Phytophylacica Sinica,2023,50(5):1269-1279. |
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| Authors: | Liu Yi Tian Xiaoli Mao Yongn Gui Lianyou Wang Fulian Zhang Guohui |
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| Institution: | Institute of Entomology, College of Agriculture, Yangtze University, Jingzhou 434025, Hubei Province, China;College of Life Sciences, Yangtze University, Jingzhou 434025, Hubei Province, China;Jingzhou Branch of Hubei Academy of Forestry, Jingzhou 434020, Hubei Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bactrocera minax glutathione S-transferase prokaryotic expression protein purification enzyme activity |
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