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基于LAMP的果蔬斯高维尔炭疽菌可视化检测方法
引用本文:罗跃,吴小毛,刘阿丽,姚小龙,李荣玉,耿广东.基于LAMP的果蔬斯高维尔炭疽菌可视化检测方法[J].浙江农业学报,2022,34(1):98.
作者姓名:罗跃  吴小毛  刘阿丽  姚小龙  李荣玉  耿广东
作者单位:贵州大学a.作物保护研究所b.农学院,贵州 贵阳 550025
基金项目:贵州省科技支撑计划(黔科合支撑〔2019〕2272);贵州省科技支撑计划(黔科合支撑〔2020〕1Y134);贵州省科技成果应用及产业化计划(黔科合成果〔2021〕059);贵州省科技平台及人才团队建设计划(黔科合平台人才〔2018〕5219);贵州省高层次创新型人才培养(百层次创新型人才)(黔科合平台人才〔2022〕);贵州大学培育项目(贵大培育〔2019〕09)
摘    要:为果蔬斯高维尔炭疽菌检测提供高效便捷、特异性好、可视化的检测方法,以果蔬斯高维尔炭疽菌内部转录间隔区ITS序列为靶基因,设计4条LAMP引物和1条环引物,通过对引物比例、反应时间、反应体系等条件的选择,建立对果蔬斯高维尔炭疽菌具有特异性扩增的LAMP检测方法。特异性试验结果显示:所建立的LAMP反应体系在最佳反应温度65 ℃条件下扩增60 min,以果蔬斯高维尔炭疽菌DNA为模板的反应体系在指示剂钙黄绿素和羟基萘酚蓝的作用下,分别呈现绿色和蓝色,反应结果为阳性,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测呈梯形条带;而以其他8株对照菌株DNA为模板的反应体系和空白对照分别呈现橘黄色和紫色,均为阴性反应,无扩增条带出现,表明该LAMP检测方法对果蔬斯高维尔炭疽菌特异性强。

关 键 词:环介导等温扩增技术  果蔬  斯高维尔炭疽菌  可视化检测  
收稿时间:2020-12-24

Visual detection method of Colletotrichum scovilleiin fruit and vegetable based on LAMP
LUO Yue,WU Xiaomao,LIU Ali,YAO Xiaolong,LI Rongyu,GENG Guangdong.Visual detection method of Colletotrichum scovilleiin fruit and vegetable based on LAMP[J].Acta Agriculturae Zhejiangensis,2022,34(1):98.
Authors:LUO Yue  WU Xiaomao  LIU Ali  YAO Xiaolong  LI Rongyu  GENG Guangdong
Institution:a. Institute of Crop Protection
b.College of Agriculture, Guizhou University, Guiyang 550025, China
Abstract:
Keywords:LAMP  fruit and vegetable  Colletotrichum scovillei  visual detection  
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