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实时荧光定量PCR检测多重耐药大肠杆菌AcrA基因mRNA表达水平
引用本文:尹秀玲,王玮,邓旭明,郎需龙,张晶,王丽艳,柳巨雄.实时荧光定量PCR检测多重耐药大肠杆菌AcrA基因mRNA表达水平[J].中国兽医学报,2007,27(5):679-682.
作者姓名:尹秀玲  王玮  邓旭明  郎需龙  张晶  王丽艳  柳巨雄
作者单位:1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;河北北方学院,河北,张家口,075031
2. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
3. 青岛农业大学,山东,青岛,266109
4. 黑龙江畜牧兽医职业学院,黑龙江,双城,150111
摘    要:体外单一药物诱导标准大肠杆菌ATCC25922,获得了耐氯霉素(CHL,MIC≥256 mg/L)、耐环丙沙星(CIP,MIC≥256 mg/L)、耐水杨酸钠(SAL,MIC≥275 mg/L)、耐四环素(T,MIC≥512 mg/L)的菌株。选取ATCC25922株,4株中度耐药菌SAL(175)、CHL(64)、T(64)、CIP(128),4株高度耐药菌SAL(275)、CHL(256)、T(512)、CIP(256),和临床分离的3株耐药大肠杆菌H1、H9、H10,通过实时荧光定量RT-PCR方法检测外输泵AcrA基因的mRNA表达水平。系统自动分析软件显示,Ct值与标准质粒浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.992。检测结果表明:H10、CHL(256)、CIP(256)拷贝数最高,达1015拷贝/μL;T(512)、H9、T(128)、SAL(275)、H1为1014拷贝/μL;CHL(128)、T(64)、CHL(64)为1013拷贝/μL;ATCC25922为1012拷贝/μL。不同程度耐药株AcrA基因的表达量不同,临床分离株和诱导的各高耐药菌株均比ATCC25922株表达量高,且差异极显著(P≤0.01)。这说明不同耐药程度的11株菌cDNA的量存在差异,AcrA基因转录水平与耐药水平成正相关。

关 键 词:AcrA基因  实时荧光定量PCR  耐药大肠杆菌
文章编号:1005-4545(2007)05-0679-04
修稿时间:2006-03-16

Real time quantitative PCR for detecting mRNA expression of AcrA gene of E. coli isolates and induced by single drug
YIN Xiu-ling,WANG Wei,DENG Xu-ming,LANG Xu-long,ZHANG Jing,WANG Li-yan,LIU Ju-xiong.Real time quantitative PCR for detecting mRNA expression of AcrA gene of E. coli isolates and induced by single drug[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(5):679-682.
Authors:YIN Xiu-ling  WANG Wei  DENG Xu-ming  LANG Xu-long  ZHANG Jing  WANG Li-yan  LIU Ju-xiong
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China ;2. Hebei Northern University, Zhangjiakou , Hebei 075131, China ;3. Qingdao Agricultural University, Qingdao , Shandong 266109, China ; 4. Heilongfiang Vocational College of Animal Husbandry and Veterinary Science, Shuangcheng, Heilongjiang 150111, China
Abstract:
Keywords:mRNA
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