| 应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒 |
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| 引用本文： | 刘红光,王中康,曹月青,夏玉先,殷幼平.应用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测柑桔衰退病毒[J].植物病理学报,2008,38(1):24-30. |
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| 作者姓名： | 刘红光 王中康 曹月青 夏玉先 殷幼平 |
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| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院基因工程研究中心, 重庆市基因功能及调控技术重点实验室, 重庆 400030 |
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| 基金项目： | 科技部技术创新项目
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农业部重点科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 根据柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列设计cquctv9/cquctv10特异引物对,以柑桔RNApolymeraseⅡ基因作为内参照,建立了柑桔衰退病的常规RT-PCR快速检测体系;依据柑桔衰退病毒P20基因序列设计cquctv1/cquctv2特异引物对和TaqMan探针cquctvp1,建立了柑桔衰退病荧光定量RT-PCR快速检测体系。常规RT-PCR检测下限是含有CTV的50pg总RNA,荧光定量RT-PCR法的检测下限是2fg纯CTV片段。荧光定量RT-PCR的灵敏度相对比常规RT-PCR高100倍。利用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR体系对从2005年3月到2006年7月采自田间的样品进行检测,结果表明,2种检测体系都有很好的特异性和准确性;对183个田间柑桔苗木样品带毒率检测结果表明,荧光定量RT-PCR检出率为(82.5%),比常规RT-PCR检出率(73.2%)高。
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| 关 键 词： | 柑桔衰退病毒 内参照 常规RT-PCR 荧光定量RT-PCR 检测 |
Detection of Citrus tristeza virus using conventional and fluorescence quantitative RT-PCR assays |
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| LIU Hong-guang,WANG Zhong-kang,CAO Yue-qing,XIA Yu-xian,YIN You-ping.Detection of Citrus tristeza virus using conventional and fluorescence quantitative RT-PCR assays[J].Acta Phytopathologica Sinica,2008,38(1):24-30. |
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| Authors: | LIU Hong-guang WANG Zhong-kang CAO Yue-qing XIA Yu-xian YIN You-ping |
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| Institution: | Gene Engineering Research Centre, Bioengineering College of Chongqing University, Key Laboratory of Gene Function and Regulation at Chongqing, Chongqing 400030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Citrus tristeza virus internal control conventional RT-PCR fluorescence quantitative RT-PCR detection |
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