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猪MEF2C基因慢病毒表达载体构建及C2C12细胞转染条件的优化
引用本文:朱弘焱 杨卉新 田玉民,等.猪MEF2C基因慢病毒表达载体构建及C2C12细胞转染条件的优化[J].现代畜牧兽医,2014(3):1-4.
作者姓名:朱弘焱 杨卉新 田玉民  
作者单位:[1] 辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁 锦州121001 [2] 南京农业大学动物医学院,江苏 南京210095
基金项目:国家自然基金资助(编号31272415/C170102)
摘    要:MEF2C基因能够控制肌细胞分化过程中的基因转录,特别在骨骼肌、心肌和平滑肌中介导细胞的分化。本研究将猪 MEF2C 基因化学合成后经 Bam HI 和 Asc I 双酶切后克隆到慢病毒表达载体 pLen-ti6.3_MCS_IRES2-EGFP中,获得的重组质粒用限制性内切酶酶切分析和测序鉴定;利用慢病毒阴性对照侵染靶细胞C2C12来确定最佳MOI值以及靶细胞最适抗生素Blasticidin剂量。结果显示猪MEF2C基因成功克隆到慢病毒表达载体中;该重组质粒侵染靶细胞C2C12的最佳MOI值为300;靶细胞抗生素的筛选剂量为4μg/mL,维持剂量为3μg/mL上述试验为建立MEF2C稳定过表达细胞系提供了前期工作基础。

关 键 词:  MEF2C基因  慢病毒表达载体  C2C12细胞

Construction of the lentiviral expression vector of porcine MEF2C gene and optimization of transfection conditions in C2C12 cells
Zhu Hongyan,Yang Huixin,Tian Yumin,Su Yuhong.Construction of the lentiviral expression vector of porcine MEF2C gene and optimization of transfection conditions in C2C12 cells[J].Modern JOurnal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,2014(3):1-4.
Authors:Zhu Hongyan  Yang Huixin  Tian Yumin  Su Yuhong
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine,Liaoning Medical University, Liaoning Jinzhou 121001; 2. College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Jiangsu Nanjing 210095)
Abstract:
Keywords:Swine  MEF2C gene  Lentiviral expression vector  C2C12 cells
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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