鸡C/EBPα抗血清制备及组织表达的特性 |
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引用本文: | 刘冰,王宇祥,石慧,王启贵,李辉.鸡C/EBPα抗血清制备及组织表达的特性[J].农业生物技术学报,2009,17(1):47-51. |
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作者姓名: | 刘冰 王宇祥 石慧 王启贵 李辉 |
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作者单位: | 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目,国家重点基础研究发展规划(973计划),黑龙江省自然科学基金重点项目 |
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摘 要: | 制备鸡(Gallus gallus)CAAT增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer-binding protein α,C/EBPα)的多克隆抗血清,并分析其组织表达特性。通过限制性酶切,从T-C/EBPα质粒中获得C/EBPα基因的编码区序列(coding sequence,CDS),构建原核表达载体,以大肠杆菌(Escherichia coli)为宿主,用IPTG诱导重组pGEX6p/C/EBPα的表达,经Glutathione Sepharose 4B柱层析纯化后,以其为免疫原制备兔抗鸡C/EBPα多抗。ELISA方法测定抗体效价达1∶12800,Western blot方法显示抗体具有较高的特异性。用此抗血清分析了鸡C/EBPα的组织表达特性,结果表明,鸡的回肠、肾脏、肌胃、腺胃、心脏、肝脏、腹脂、脾脏等组织中C/EBPα蛋白表达量较高,而在胸肌、腿肌中表达量较低。同时分析C/EBPα基因在高低脂系公鸡肝脏组织中的表达差异,结果显示该基因在低脂系公鸡肝脏中表达量较高。
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关 键 词: | 鸡 CAAT增强子结合蛋白α 抗血清 表达特性 |
收稿时间: | 2008-4-25 |
修稿时间: | 2008-6-5 |
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