| A型塞内卡病毒VP1结构蛋白在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 张斌,刘建奇,张杰,韩宇,巨敏莹,乌吉斯古楞,宋庆庆,关平原.A型塞内卡病毒VP1结构蛋白在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定[J].中国动物检疫,2020,37(12):114-119. |
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| 作者姓名： | 张斌 刘建奇 张杰 韩宇 巨敏莹 乌吉斯古楞 宋庆庆 关平原 |
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| 摘 要： | 目前在昆虫杆状病毒表达系统（baculovirus expression vector system，BEVS）中表达A型塞内卡病毒（Senecavirus A，SVA）结构蛋白VP1尚未见报道。本研究将VP1基因通过限制性酶切位点插入杆状病毒载体pFastBac I，然后将鉴定正确的重组载体转化至DH10Bac感受态细胞，经蓝白斑筛选，对鉴定正确的菌落提取质粒。将质粒转染Sf9昆虫细胞，待有明显细胞病变后收获重组杆状病毒rBac-I-VP1，并进行病毒滴度测定。随后通过蛋白免疫印记（Western Blot）和间接免疫荧光（IFA）鉴定VP1蛋白表达情况。结果显示，重组杆状病毒rBac-I-VP1滴度为6.8×105 pfu/mL；Western Blot可检测到相对分子质量约27 kDa的表达产物，且其能够被SVA兔阳性多克隆血清识别；IFA试验显示，VP1蛋白能够在Sf9细胞内表达。结果表明，本研究利用BEVS表达的SVA VP1蛋白具有良好的免疫反应性，为其后期功能研究及SVA诊断试剂研制提供了技术基础。
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| 关 键 词： | 猪塞内卡病毒 VP1蛋白 昆虫杆状病毒表达系统 |
Expression and Identification of Senecavirus A Structural Protein VP1 in Insect Baculovirus |
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| Zhang Bin,Liu Jianqi,Zhang Jie,Han Yu,Ju Minying,Wujisiguleng,Song Qingqing,Guan Pingyuan.Expression and Identification of Senecavirus A Structural Protein VP1 in Insect Baculovirus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2020,37(12):114-119. |
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| Authors: | Zhang Bin Liu Jianqi Zhang Jie Han Yu Ju Minying Wujisiguleng Song Qingqing Guan Pingyuan |
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