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猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌联合检测芯片的研制及应用
引用本文:肖国生,曹三杰,黄小波,文心田.猪胸膜肺炎放线杆菌、肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌联合检测芯片的研制及应用[J].畜牧兽医学报,2010,41(1).
作者姓名:肖国生  曹三杰  黄小波  文心田
作者单位:1. 四川农业大学动物医学院,基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014;重庆三峡学院生物系,重庆,404000
2. 四川农业大学动物医学院,基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014
基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划基金资助项目,重庆市科委自然科学基金计划资助项目 
摘    要:本研究旨在建立联合检测胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌的DNA芯片.用7个从3种病菌基因组中扩增出的不同特异性靶DNA制作基因芯片,并对芯片的靶DNA和探针浓度、杂交温度、重复性、特异性和灵敏度进行了研究.结果表明,检测芯片的特异性强,能与测试的李氏放线杆菌、猪鼻支原体和副猪嗜血杆菌等9种病原区分;灵敏度高,在50μL标记反应体系中,能检测到10~50 pg基组DNA,芯片可重复利用.用芯片对44株目标菌的不同型标准菌株、分离株和疫苗株进行了检测.其信号值≥1 000,信号噪音比(SNR)≥6.用芯片对45头病猪和97头健康猪的临床样品选择培养物进行了检测,其检出率分别为多杀性巴氏杆菌71.1%和49.5%、胸膜肺炎放线杆菌42.2%和26.8%、猪肺炎支原体20%和22.7%,混合感染率分别为42.2%和24.7%.在检测临床样品时,芯片法与PCR的符合率为97.8%~100%,与分离鉴定法的符合率为87.6%~95.6%.研究表明,研制的芯片特异性强、敏感性高、可重复使用,是一种能有效用于胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌和猪肺炎支原体鉴定和联合检测的新工具.

关 键 词:基因芯片  胸膜肺炎放线杆菌  猪肺炎支原体  多杀性巴氏杆菌  检测

Development and Application of DNA Microarray for Simultaneously Detecting Actinobacillus pleuropneumoniae,Mycoplasma hyopneumoniae and Pasteurella multocida
XIAO Guo-sheng,CAO San-jie,HUANG Xiao-bo,WEN Xin-tian.Development and Application of DNA Microarray for Simultaneously Detecting Actinobacillus pleuropneumoniae,Mycoplasma hyopneumoniae and Pasteurella multocida[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2010,41(1).
Authors:XIAO Guo-sheng  CAO San-jie  HUANG Xiao-bo  WEN Xin-tian
Abstract:The study aimed to establish a DNA microarray to simultaneously detecting Actinobacillus pleuropneumoniae,Mycoplasma hyopneumoniae and Pasteurella multocida.7 different specific target DNA fragments designed and amplified from the genomes of the bacteria were used to construct the DNA microarray.The concentrations of target DNA and probes,hybridization temperature,reproducibility,specificity and sensitivity of the microarray were tested.The microarray could be used repeatedly and possessed high specificity....
Keywords:microarray  Actinobacillus pleuropneurnoniae  Mycoplasma hyopneumoniae  Pas-teurella multocida  detection
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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