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| 针对银狐主要传染病血清学检测的免疫球蛋白单克隆抗体的制备 | |
| 摘 要： | 以饱和硫酸铵沉淀法和Agarose-Protein G亲和层析技术相结合从银狐血清中提纯免疫球蛋白(IgG),再经SDS-PAGE电泳鉴定,将纯化的免疫球蛋白(IgG)作为抗原,采用常规方法免疫BALB/c小鼠,3次免疫后取脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞相融合制备杂交瘤细胞,利用间接ELISA、Western blot等方法进行鉴定及阳性克隆的筛选,对杂交瘤细胞产生的单克隆抗体进行鉴定和活性测定。结果得到与银狐免疫球蛋白(IgG)发生特异性反应的3株单克隆抗体,分别命名为E2、1E3和2G10。Western blot结果表明,E2、1E3和2G10单克隆抗体能与银狐IgG蛋白特异性结合。经抗体亚型鉴定E2、1E3和2G10均为IgG1、Kappa链。生产提纯的腹水单克隆抗体经Western blot分析效价可达到1∶6 000。该研究利用抗银狐IgG单克隆抗体制备检测感染主要传染病的银狐血清抗体试纸条具有良好的特异性与灵敏性,可以作为检测银狐主要传染病的一种新方法。 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |