| 藏绵羊朊蛋白基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 陈豪泰,吴润,刘湘涛,谢庆阁.藏绵羊朊蛋白基因的原核表达[J].中国兽医科技,2006,36(11):859-863. |
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| 作者姓名： | 陈豪泰 吴润 刘湘涛 谢庆阁 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室,甘肃兰州730046 [2]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070 |
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| 基金项目： | 农业部畜禽病毒学重点实验室基金资助项目（2002-01）;兰州兽医研究所所长基金资助项目（2004-2005） |
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| 摘 要： | 从藏绵羊全血中提取基因组总DNA，用所设计的引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白（PrP^c）基因。测序分析表明，所克隆的羊PrP^c基因片段大小为771bp，包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列，其与国内外报道的序列基本相同。将目的基因与经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切的载体pGEX-4T-1连接后转化宿主菌BL21（DE3），挑选重组阳性菌用IPTG诱导表达，收集不同培养时间的菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting。结果表明，PrP基因在大肠杆菌中成功表达，并能被抗牛PrP^c单抗4C11识别。凝胶薄层扫描结果显示，表达蛋白约占菌体总蛋白的309／6～45％，目的蛋白以包涵体的形式存在，包涵体经变性裂解、纯化和复性后得到具有一定生物学活性的目的蛋白。
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| 关 键 词： | 重组朊蛋白 藏绵羊 原核表达 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）11-0859-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-13 |
| 修稿时间： | 2006-10-11 |
Prokaryotic expression of prion protein gene of Tibet sheep |
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| CHEN Hao-tai,WU Run ,LIU Xiang-tao,XIE Qing-ge.Prokaryotic expression of prion protein gene of Tibet sheep[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(11):859-863. |
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| Authors: | CHEN Hao-tai WU Run LIU Xiang-tao XIE Qing-ge |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant prion protein Tibet sheep prokaryotic expression |
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