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均匀设计优化澳洲坚果SRAP反应体系
引用本文:郭凌飞,邹明宏,杜丽清,曾辉,陆超忠.均匀设计优化澳洲坚果SRAP反应体系[J].果树学报,2008,25(2):250-253.
作者姓名:郭凌飞  邹明宏  杜丽清  曾辉  陆超忠
作者单位:1. 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,广东湛江,524091;华南热带农业大学园艺学院,海南儋州,571737
2. 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,广东湛江,524091
基金项目:农业科技成果转化资金项目(04EFN216900382),云南省科技计划项目(2006YX16),国家基础条件平台项目子项目(2005DKA21005-27)
摘    要:以澳洲坚果部分种质为试材,采用U25(55)均匀设计表,对SRAP-PCR反应体系中Taq DNA聚合酶、模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物5个组分的浓度进行优化。结果表明澳洲坚果25μL的SRAP反应体系的最佳组分包括2.5μL10×PCR buffer、1 UTaq DNA聚合酶、40 ng模板DNA、0.2 mmol/LdNTPs、0.2μmol/L引物和3.0 mmol/LMg2+。利用所确立的体系对部分澳洲坚果种质进行扩增的结果清晰可靠,多态性好。

关 键 词:澳洲坚果  SRAP  体系优化  均匀设计
文章编号:1009-9980(2008)02-250-04
收稿时间:2007-07-02
修稿时间:2008-01-23

Optimization of the sequence-related amplified polymorphism (SRAP) reaction system for macadamia by uniform design
GUO Ling-fei,ZOU Ming-hong,DU Li-qing,ZENG Hui,LU Chao-zhong.Optimization of the sequence-related amplified polymorphism (SRAP) reaction system for macadamia by uniform design[J].Journal of Fruit Science,2008,25(2):250-253.
Authors:GUO Ling-fei  ZOU Ming-hong  DU Li-qing  ZENG Hui  LU Chao-zhong
Abstract:The uniform design was used to optimize the sequence-related amplified polymorphism(SRAP) reaction system for macadamia,which involved 5 factors,i.e.Taq DNA polymerase,template DNA,dNTPs,primer and Mg2+,each at 5 levels.The result showed that an optimal 25 μL reaction system of SRAP for macadamia included 2.5 μL 10×PCR buffer,1 U Taq DNA polymerase,40 ng template DNA,0.2 mmol/L dNTPs,0.2 μmol/L primer and 3.0 mmol/L Mg2+.Application of this optimum reaction system to fingerprint some macadamia accessions produced clear polymorphic patterns.
Keywords:Macadamia  SRAP  System optimization  Uniform design
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