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快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法
引用本文:戈胜强,柴同杰,马保臣,李晓霞,蔡玉梅,吕静,乔孛贩,王炳晓.快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法[J].畜牧兽医学报,2008,39(11).
作者姓名:戈胜强  柴同杰  马保臣  李晓霞  蔡玉梅  吕静  乔孛贩  王炳晓
作者单位:山东农业大学动物医学院,泰安,271018
摘    要:综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法,采用β-巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的DNA,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法。建立双重PCR方法,同时完成对细菌16SrRNA保守区特异性基因片段和真菌18SrRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染。对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重PCR方法对比鉴定。结果表明,双重PCR检测乳样细菌的最小浓度为10^2CFU/mL,检测乳样真菌的最小浓度为10^3CFU/mL。双重PCR方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(P〉0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(P〈0.01)。

关 键 词:奶牛乳腺炎  细菌  真菌  双重PCR

Development and Application of Double-PCR Method for Quick Detection of Bacteria and Yeast from Bovine Mastitis
GE Sheng-qiang,CHAI Tong-jie,MA Bao-chen,LI Xiao-xia,CAI Yu-mei,Lv Jing,QIN Mei,WANG Bing-xiao.Development and Application of Double-PCR Method for Quick Detection of Bacteria and Yeast from Bovine Mastitis[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(11).
Authors:GE Sheng-qiang  CHAI Tong-jie  MA Bao-chen  LI Xiao-xia  CAI Yu-mei  Lv Jing  QIN Mei  WANG Bing-xiao
Abstract:
Keywords:bovine mastitis  bacteria  yeasts  double-PCR  
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