| 嗜水气单胞菌刺激下鲤血清质子转运载体15a2 (Slc15a2)的表达分析 |
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| 引用本文： | 姜洲,薛亚果,张猛,朱雷,王磊,李学军,董传举.嗜水气单胞菌刺激下鲤血清质子转运载体15a2 (Slc15a2)的表达分析[J].水产学报,2022,46(5):797-804. |
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| 作者姓名： | 姜洲 薛亚果 张猛 朱雷 王磊 李学军 董传举 |
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| 作者单位： | 河南师范大学,河南师范大学水产学院,河南师范大学水产学院,河南师范大学水产学院,河南师范大学水产学院,河南师范大学水产学院,河南师范大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31801032);淡水鱼类养殖国家地方联合工程实验室开放项目(KF-2016-03);河南师范大学博士基金项目(qd16159) |
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| 摘 要： | 鲤Slc15a2基因是利用质子梯度逆浓度转运小肽和肽类似物到各种组织细胞内的一种高亲和力、低容量的小肽转运载体，该基因在免疫反应中也起到重要作用。为解析鲤Slc15a2基因在嗜水气单胞菌侵染过程中对免疫应答机制的影响，本文从蛋白质水平上探究了Slc15a2（Slc15a2-1和Slc15a2-2）基因在鲤体内免疫应答机制中的变化。将Slc15a2-1和Slc15a2-2基因含有部分抗原决定簇的片段加入双酶切位点BamH Ⅰ和Hind Ⅲ后连接至pET-32a (+)，构建表达载体，并成功制备鼠源Slc15a2-1和Slc15a2-2基因多克隆抗体。通过ELISA法检测嗜水气单胞菌感染后鲤血清中Slc15a2-1和Slc15a2-2的蛋白表达变化发现：1、感染后两拷贝的最高蛋白表达水平与正常组相比，分别增加了4.81和2.48倍；且Slc15a2-2的蛋白表达量与Slc15a2-1相比从0 h到48 h一直处于较高表达水平。2、从整体方面来看，在Slc15a2的两个拷贝之间具有相似的表达趋势，均为先升高后降低再升高再降低；但Slc15a2-1在3 h达到第一个表达高峰，而Slc15a2-2则在6 h达到第一个表达高峰。3、从6 h到24h的四个时期，Slc15a2-1和Slc15a2-2蛋白表达呈现互补的表达趋势，即在同一时期一个拷贝的表达量显著下降，另一个拷贝的表达量显著升高，但总体维持较高表达水平。结果表明：本实验制备的多克隆抗体具有较高的亲和力和特异性，在嗜水气单胞菌感染后，两个拷贝之间整体具有相似的表达趋势说明可能具有相似的基因功能；Slc15a2-1虽在3 h时率先做出低表达量响应，但与Slc15a2-1相比，Slc15a2-2在0 h至48 h之间具有显著的高表达量，可能是作为该基因拷贝中的主效基因，并且从6 h到24 h时，两个拷贝就一直呈现互补的表达方式，共同表达量维持在高水平，面对病原侵害时能做有效响应。本研究可为深入了解Slc15a2基因的鱼类免疫反应调控机制提供一定的基础。
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| 关 键 词： | 鲤 Slc15a2基因 抗体 嗜水气单胞菌 |
| 收稿时间： | 2020/11/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/6/8 0:00:00 |
Expression analysis of serum Slc15a2 in common carp (Cyprinus carpio) stimulated by Aeromonas hydrophila |
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| JIANG Zhou,XUE Yaguo,ZHANG Meng,ZHU Lei,WANG Lei,LI Xuejun,DONG Chuanju.Expression analysis of serum Slc15a2 in common carp (Cyprinus carpio) stimulated by Aeromonas hydrophila[J].Journal of Fisheries of China,2022,46(5):797-804. |
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| Authors: | JIANG Zhou XUE Yaguo ZHANG Meng ZHU Lei WANG Lei LI Xuejun DONG Chuanju |
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| Institution: | Henan Normal University,,,,,,Henan Normal University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cyprinus carpio Slc15a2 gene antibody Aeromonas hydrophila |
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