|
|||||
|
|
| 柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG7基因的克隆与表达 | |
| 引用本文： | 李红炳.柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG7基因的克隆与表达[J].云南畜牧兽医,2011(6):22-24. |
| 作者姓名： | 李红炳 |
| 作者单位： | 云南生物制药有限公司,云南昆明,650224 |
| 摘 要： | 应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫杨陵株的第二代裂殖子总RNA扩增出表面抗原SAG7的基因序列,并将其克隆至pGEM-T easy载体转化DH5a菌中。再用一对特异性引物扩增出N端不含信号肽序列的SAG7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后与同样双酶切的PET-32a(+)连接并转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用PCR方法和双酶切筛选阳性克隆并测序,验证读码框是否正确。将筛选的阳性克隆菌经IPTG诱导,获得了SAG7重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达,表达量占菌体总蛋白的50%以上,融合蛋白的分子量约为45kDa。菌体经超声裂解后经SDS-PAGE分析,重组抗原是以包涵体形式存在。 |
| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 表面抗原 SAG7 原核表达 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |