表达伪狂犬病毒gC糖蛋白基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究 |
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引用本文: | 陈振海,杨汉春,郭鑫,陈艳红.表达伪狂犬病毒gC糖蛋白基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究[J].农业生物技术学报,2007,15(2). |
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作者姓名: | 陈振海 杨汉春 郭鑫 陈艳红 |
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作者单位: | 中国农业大学农业部预防兽医学重点开放实验室,北京 |
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摘 要: | 通过双酶切将伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)Fa株gC囊膜糖蛋白基因片断亚克隆到5型腺病毒AdMax系统穿梭质粒pDC316中,得到pDC316-gC。用此质粒与腺病毒DNA辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293细胞,初步成功包装出重组腺病毒Adv-gC。进一步通过PCR鉴定和病毒空斑纯化,得到纯的高效价Adv-gC病毒液。间接免疫荧光实验证明此重组病毒能表达PRV gC蛋白。该病毒经肌肉免疫BALB/c小鼠,结果表明能诱导小鼠产生特异的体液和细胞免疫反应,即针对gC蛋白的总抗体IgG、针对PRV的中和抗体和足垫迟发型超敏反应DTH。攻毒实验表明,此重组病毒能提供100%的免疫保护,而对照组为0%。表达PRV gC基因复制缺陷型重组腺病毒的构建及其免疫效果的初步测试,为研制PRV新型活载体疫苗奠定了基础。
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收稿时间: | 2006-7-14 |
修稿时间: | 2006-9-11 |
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