| 鸡IFIT5对J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞内复制的影响 |
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| 引用本文： | 朱丽霖,王后坤,陈雪阳,刘晶,梁雄燕,方春,杨玉莹.鸡IFIT5对J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞内复制的影响[J].中国畜牧兽医,2023,50(1):310-316. |
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| 作者姓名： | 朱丽霖 王后坤 陈雪阳 刘晶 梁雄燕 方春 杨玉莹 |
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| 作者单位： | 长江大学动物科学学院, 荆州 434025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31972646） |
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| 摘 要： | 【目的】制备鸡干扰素诱导蛋白含三角形四肽重复5(IFIT5)多克隆抗体，以探究IFIT5对J型禽白血病病毒(ALV-J)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以感染ALV-J的鸡脾脏组织细胞提取的RNA反转录获得的cDNA作为模板，对IFIT5基因进行PCR扩增，利用重组酶将纯化后的PCR产物和线性化载体进行连接，构建重组质粒pET-28a-IFIT5和pcDNA5-flag-IFIT5并测序。将测序正确的重组质粒pET-28a-IFIT5转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达，表达的融合蛋白His-IFIT5纯化后免疫6周龄BALB/c雌鼠制备多克隆抗体，通过Western blotting鉴定抗体的特异性，利用间接ELISA测定抗体的效价。将测序正确的重组质粒pcDNA5-flag-IFIT5转染DF-1细胞，24 h后接种ALV-J,通过Western blotting检测DF-1细胞中过表达IFIT5对ALV-J复制的影响。【结果】试验成功扩增到大小为1 440 bp的IFIT5基因，并成功构建重组质粒pET-28a-IFIT5和pcDNA5-flag-IFIT...
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| 关 键 词： | IFIT5基因 J型禽白血病病毒(ALV-J) 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2022-05-20 |
Effect of Chicken IFIT5 on Replication of J Subgroup Avian Leukemia Virus Within DF-1 Cells |
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| ZHU Lilin,WANG Houkun,CHEN Xueyang,LIU Jing,LIANG Xiongyan,FANG Chun,YANG Yuying.Effect of Chicken IFIT5 on Replication of J Subgroup Avian Leukemia Virus Within DF-1 Cells[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2023,50(1):310-316. |
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| Authors: | ZHU Lilin WANG Houkun CHEN Xueyang LIU Jing LIANG Xiongyan FANG Chun YANG Yuying |
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| Institution: | College of Animal Science, Yangtze University, Jingzhou 434025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IFIT5 gene J subgroup Avian leukemia virus (ALV-J) prokaryotic expression polyclonal antibody |
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