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质粒载体表达抑制猪瘟病毒shRNA在猪胚胎成纤维细胞上的复制
引用本文:王铁东,李莉,逄大新,涂长春,欧阳红生.质粒载体表达抑制猪瘟病毒shRNA在猪胚胎成纤维细胞上的复制[J].中国兽医学报,2009,29(3).
作者姓名:王铁东  李莉  逄大新  涂长春  欧阳红生
作者单位:1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
2. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
基金项目:转基因生物新品种培育科技重大专项基金 
摘    要:以质粒pSilencer3.1Hygro为基础,构建了针对猪瘟病毒Npro基因和NS4A基因mRNA的siRNA双表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞后,在潮霉素B的筛选压力下,获得5株稳定整合shRNA表达盒的猪胚胎成纤维细胞克隆.以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72 h后对感染细胞克隆进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获得的5株细胞克隆中,有3株细胞上猪瘟病毒的增殖明显降低,表明所构建siRNA双表达载体转录产生的siRNA可以有效抑制CSFV的复制.本试验为研究猪瘟病毒的防治和通过RNAi建立猪的抗病育种提供了新的方法.

关 键 词:猪瘟病毒  猪胚胎成纤维细胞  抗病毒

Inhibition of classical swine fever virus replication by plasid-delivered shRNA in porcine fetal fibroblasts
WANG Tie-dong,LI Li,PANG Da-xin,TU Chang-chun,OUYANG Hong-sheng.Inhibition of classical swine fever virus replication by plasid-delivered shRNA in porcine fetal fibroblasts[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(3).
Authors:WANG Tie-dong  LI Li  PANG Da-xin  TU Chang-chun  OUYANG Hong-sheng
Abstract:
Keywords:RNAi
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