| 鸡chUSP1 His594Ala突变使其去泛素化酶活性丧失 |
| |
| 引用本文： | 郑海南,赵程程,邓晨,于佩峰,王梦云,吴山力,吕岩,艾永兴.鸡chUSP1 His594Ala突变使其去泛素化酶活性丧失[J].中国兽医学报,2015,35(5):745-750. |
| |
| 作者姓名： | 郑海南 赵程程 邓晨 于佩峰 王梦云 吴山力 吕岩 艾永兴 |
| |
| 作者单位： | 1. 吉林大学动物科学学院,吉林长春,130062
2. 吉林大学白求恩医学学院,吉林长春,130021 |
| |
| 摘 要： | 泛素特异性蛋白酶1(ubiquitin-specific proteases 1,USP1)是一种去泛素化酶,它在DNA损伤修复应答过程中发挥重要功能。已证明USP1与UAF1(USP1-associated factor 1)形成复合物后,其酶活性会得到极大的提升。chUSP1为在鸡细胞中发现的一种去泛素化酶,生物信息学分析发现它与人USP1同源性高达72%。本研究以本室扩增的chUSP1基因和chUAF1基因,使用bac-to-bac系统表达了chUSP1GG680,681AA单体及chUSP1GG680,681AA/chUAF1复合体。并根据人USP1预测将chUSP1一个可能的活性中心位点第594位组氨酸突变为丙氨酸,并纯化了此突变型的单体和复合体。应用底物Di-Ub/Ub2 WT Chains(K63-linked)及Di-Ub/Ub2 WT Chains(K48-linked)对chUSP1GG680,681AA和突变型chUSP1HGG594,680,681AA进行酶活性分析。试验结果表明chUSP1具有切割Ub链底物的酶活性,且第594位组氨酸残基突变影响chUSP1的去泛素化酶活性。而chUAF1可以与chUSP1相互作用形成复合体,并且明显提高chUSP1酶活性。
|
| 关 键 词： | chUSP1 杆状病毒 昆虫细胞 酶活性分析 |
His 594-to-Ala mutation in chicken USP1 eliminated its deubiquitinating activity |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | chUSP1 deubiquitinase baculovirus Sf9 mutation |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
