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Intein融合表达鸡IL-2蛋白的多克隆抗体制备
引用本文:邓晨,郑海南,于佩峰,张鑫,吴山力,王梦云,吕岩,艾永兴.Intein融合表达鸡IL-2蛋白的多克隆抗体制备[J].中国兽医学报,2015,35(6):889-894.
作者姓名:邓晨  郑海南  于佩峰  张鑫  吴山力  王梦云  吕岩  艾永兴
作者单位:1. 吉林大学动物科学学院,吉林长春,130062
2. 吉林大学基础医学院,吉林长春,130021
摘    要:鸡白介素-2(chIL-2)是一种对T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞复制与分化起重要作用的细胞因子,并在机体天然免疫和获得性免疫的发生与维持中发挥重要作用。本研究中,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366bp)克隆连接到pTYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362bp的Intein基因融合在同一开放阅读框内,编码相对分子质量约为71 000的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-intein融合蛋白,应用chitin-sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western blot分析抗体特异性。结果,应用纯化的chIL-2-intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。

关 键 词:intein  chicken  IL-2  pTYB1  多克隆抗体

Generation and characterization of polyclonal antibodies against chicken IL-2 using IL-2-intein fusion protein
Abstract:
Keywords:intein  chicken IL-2  pTYB1 vector  polyclonal antibodies
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