|
|||||
|
|
| 流产嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 保雨,聂福平,王昱,杨俊,袁曾壮,叶自霞,刘亚娟,张姜琳,吴蕊.流产嗜衣原体TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2015,37(7). |
| 作者姓名： | 保雨 聂福平 王昱 杨俊 袁曾壮 叶自霞 刘亚娟 张姜琳 吴蕊 |
| 作者单位： | 1. 西南大学动物科技学院,重庆400715;重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程中心,重庆400020 2. 重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程中心,重庆400020;重庆大学生物工程学院,重庆400030 3. 重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程中心,重庆400020;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054 4. 重庆出入境检验检疫局重庆市进出口食品安全工程中心,重庆,400020 |
| 基金项目： | 质检公益性项目，国家质检总局科技项目 |
| 摘 要： | 为建立一种快速、准确检测流产嗜衣原体(C.abortus)Taq Man-MGB荧光定量PCR方法,本研究根据C.abortus主要外膜蛋白基因的特异保守序列设计引物及探针,并优化反应条件,建立了检测C.abortus的荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.6×103拷贝/μL~1.6×107拷贝/μL内具有良好的线性关系,相关系数为0.9999。该方法仅对C.abortus的靶基因扩增呈阳性,而对鹦鹉热嗜衣原体、家畜嗜衣原体、鼠衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、猪源衣原体核酸扩增结果均为阴性,特异性强;其最低检出限为1.6拷贝/μL;组内和组间重复性试验变异系数均小于3%,具有良好的重复性。利用建立的方法和普通PCR方法同时对225份临床样品进行检测,结果显示荧光定量PCR检出率比普通PCR高4.5%,表现较高的灵敏度和准确性。本研究建立的方法对C.abortus的临床鉴别检测和疾病诊断具有重要意义。 |
| 关 键 词： | 流产嗜衣原体 TaqMan-MGB 荧光定量PCR |
Establishment of TaqMan-MGB real-time PCR for detecting Chlamydophila abortus |
|
| Abstract: | |
| Keywords: | Chlamydophila abortus TaqMan-MGB real-time PCR |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |