| 蜂素信号肽介导猪干扰素-γ在杆状病毒中分泌表达及抗病毒活性检测 |
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| 引用本文： | 王彦彬,魏战勇,陈红英,王建举,郭小参,崔保安.蜂素信号肽介导猪干扰素-γ在杆状病毒中分泌表达及抗病毒活性检测[J].中国兽医学报,2010,30(11). |
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| 作者姓名： | 王彦彬 魏战勇 陈红英 王建举 郭小参 崔保安 |
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| 作者单位： | 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家"十一五"科技支撑计划资助项目 |
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| 摘 要： | 应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟的猪干扰素-γ基因插入供体质粒pFastBacTM1polyhedrin启动子控制下的多克隆位点,引入昆虫细胞可识别的蜂素信号肽(Honeybee melittin signal peptide)取代猪干扰素-γ原有信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体质粒,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组蛋白通过SDS-PAGE、间接免疫荧光、Western-blot证明在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得分泌表达。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性是1.38×106U/mL。
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| 关 键 词： | 猪 干扰素 杆状病毒 抗病毒活性 |
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