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| 适应H_9亚型禽流感病毒增殖的重组R-MDCK细胞系的建立 | |
| 作者单位： | ;1.河南农业大学牧医工程学院 |
| 摘 要： | 克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达质粒p IRES中,构建重组质粒p IRES-ST3GalⅠ,鉴定正确的真核表达载体转染MDCK细胞,用G418抗性筛选稳定表达的重组细胞R-MDCK。PCR及RT-PCR鉴定表达阳性的单克隆细胞株。将不同H_9亚型禽流感病毒毒株按相同滴度接种R-MDCK细胞和空白MDCK细胞,通过HA试验和TCID_(50)试验,检测不同H_9亚型禽流感病毒毒株在R-MDCK细胞上的增殖效果。结果发现,所有H_9亚型禽流感病毒毒株在RMDCK细胞HA和TCID_(50)结果均显著高于空白MDCK细胞。ST3GalⅠ基因在第12代R-MDCK细胞中仍能稳定表达,R-MDCK细胞可显著提升H_9亚型低致病性禽流感病毒培养的滴度,可以替代鸡胚用于H_9亚型低致病性禽流感病毒的生产。 |
| 关 键 词： | ST3GalⅠ基因 重组质粒 H9亚型AIV 重组MDCK细胞 |
The establishment of recombinant R-MDCK cell line adaptable to the proliferation of H_9 subtype avian influenza virus |
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| Abstract: | |
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