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| PRRSV变异株ORF5全基因的可溶性表达与重组蛋白的纯化 | |
| 作者单位： | ;1.青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室 |
| 摘 要： | 为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株可溶性糖基化囊膜蛋白(GP5),从p MD18-T-ORF5(V)重组质粒中PCR扩增得到PRRSV变异株LX13(1)结构蛋白ORF5全基因编码区,并克隆至原核表达载体p Cold TF DNA上,得到重组表达质粒p Cold-TF-GP5(V),转化大肠埃希菌BL21中诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析。结果表明,目的基因插入位置和阅读框正确,成功表达的融合蛋白分子量约为75.2 ku,并以可溶性蛋白的形式存在,表达量约占菌体总蛋白含量的22.26%。该融合蛋白能与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,说明重组蛋白具有反应原性。该可溶性重组蛋白的获得为研究PRRSV变异株GP5蛋白的抗原性奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异株 ORF5基因 可溶性原核表达 |
Soluble Prokaryotic Expression of ORF5 Gene of PRRSV Variant and Purification of Recombinant Protein |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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