| 转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘双,赵新,李瑞环,刘娜,兰青阔,檀建新,王永.转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立[J].中国农业大学学报,2021,26(11):49-58. |
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| 作者姓名： | 刘双 赵新 李瑞环 刘娜 兰青阔 檀建新 王永 |
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| 作者单位： | 天津市农业科学院 生物技术研究所, 天津 300381;河北农业大学 食品科技学院, 河北 保定 071001;天津市农业科学院 生物技术研究所, 天津 300381; 河北农业大学 食品科技学院, 河北 保定 071001 |
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| 基金项目： | 转基因重大专项(2019ZX08013-002,2019ZX08004001) |
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| 摘 要： | 为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测，以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列，设计PCR扩增引物和TaqMan探针，并对引物探针浓度进行优化，经特异性测试，建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号；2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下，方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝；定量限(LOQ)为66.0个拷贝；3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R2>0.99，DNA含量线性范围为0.08%~100.00%。综上，本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高，可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。
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| 关 键 词： | 微滴式数字PCR 转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’ 精准定量 转化体特异性 |
| 收稿时间： | 2020/12/3 0:00:00 |
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