| 3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 赵绪永,马 辉,宁豫昌.3种猪繁殖障碍性病毒Real-time PCR快速检测方法的建立[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2012,40(12):27-33. |
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| 作者姓名： | 赵绪永 马 辉 宁豫昌 |
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| 作者单位： | 郑州牧业工程高等专科学校 生物工程系;郑州牧业工程高等专科学校 生物工程系;郑州牧业工程高等专科学校 生物工程系 |
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| 基金项目： | 河南省教育厅自然科学研究计划项目(2011A230016) |
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| 摘 要： | 【目的】建立可同时检测猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的多重实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank数据库中PRV、PPV和PCV2的核苷酸序列,设计3对特异性引物和探针,以10倍系列稀释的阳性质粒为模板,优化反应条件,建立检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,并对其敏感性、重复性和特异性进行检验;分别采用单项和多重Real-time PCR方法,对临床收集的42份疑似病料进行检测,比较2种方法的符合率。【结果】特异性和灵敏度试验表明,建立的多重Real-time PCR检测方法具有高度特异性,与其他病原无明显交叉反应;检测灵敏度高,可检出1.0×101拷贝/μL的阳性质粒或1TCID50/mL的病毒样品。用多重Real-time PCR对42份临床疑似病料进行检测,其检测结果与单重Real-time PCR结果完全一致,表明多重Real-time PCR方法是可行的。【结论】建立了可同时检测PRV、PPV和PCV2的多重Real-time PCR方法,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。
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| 关 键 词： | 猪伪狂犬病毒 猪细小病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 多重实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 4/1/2012 12:00:00 AM |
Development of a multiplex Real-time fluorescent quantitative PCR assay for simultaneous detection of PRV,PPV and PCV2 |
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| ZHAO Xu-yong,MA Hui,NING Yu-chang,ZHAO Li.Development of a multiplex Real-time fluorescent quantitative PCR assay for simultaneous detection of PRV,PPV and PCV2[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2012,40(12):27-33. |
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| Authors: | ZHAO Xu-yong MA Hui NING Yu-chang ZHAO Li |
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| Institution: | (Department of Biological Engineering,Zhengzhou College of Animal Husbandry Engineering,Zhengzhou,Henan 450011,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine pseudorabies virus(PRV) porcine parvovirus(PPV) porcine circovirus type 2 (PCV2) multiplex Real-time fluorescent quantitative PCR |
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