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鸡β-防御素Gal-3在转基因紫花苜蓿中的表达
引用本文:金立波,刘秀明,刘 磊.鸡β-防御素Gal-3在转基因紫花苜蓿中的表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2012,40(12):177-183.
作者姓名:金立波  刘秀明  刘 磊
作者单位:吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;吉林医药学院 检验学院
基金项目:吉林省科技发展计划项目(20090244,20100147);吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(2009297)
摘    要:【目的】在紫花苜蓿中表达鸡β-防御素3(Gal-3),为利用紫花苜蓿规模化生产Gal-3奠定基础。【方法】PCR扩增鸡Gal-3基因,以潮霉素作为转基因植物的选择标记,将鸡β-防御素Gal-3基因克隆至表达载体pCAM-BIA1390R(简写为p1390R)上,构建重组表达质粒p1390R-Gal-3;采用冻融法将质粒p1390R-Gal-3转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化至紫花苜蓿;采用PCR检测、Southern blot筛选阳性转基因苜蓿植株,并对Gal-3蛋白进行抑菌活性研究。【结果】PCR扩增获得了240bp的鸡Gal-3基因,成功构建植物表达载体p1390R-Gal-3,在苜蓿中初步建立了Gal-3的遗传转化体系,共获得22株转基因苜蓿植株,其中4株为阳性植株,转化率为18.2%。PCR扩增和Southern blot检测表明,Gal-3基因已整合到转基因苜蓿基因组中。提取转基因苜蓿的Gal-3蛋白进行抑菌活性试验,结果显示转基因苜蓿对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌均有抑制作用。【结论】获得了具有抑菌活性的转鸡β-防御素Gal-3基因的苜蓿植株。

关 键 词:农杆菌  鸡β-防御素Gal-3  紫花苜蓿  遗传转化

Expression of chicken beta defensin Gallinacin-3 in transgenic alfalfa
JIN Li-bo,LIU Xiu-ming,LIU Lei,LIU Min,DU Shu-huan,ZHU Hai-lin,WANG Hui-yan.Expression of chicken beta defensin Gallinacin-3 in transgenic alfalfa[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2012,40(12):177-183.
Authors:JIN Li-bo  LIU Xiu-ming  LIU Lei  LIU Min  DU Shu-huan  ZHU Hai-lin  WANG Hui-yan
Institution:1,2(1 Ministry of Education Engineering Research Center of Bioreactor and Pharmaceutical Development,Jilin Agricultural University, Changchun,Jilin 130118,China;2 Laboratory Medical College,Jilin Medical College,Jilin,Jilin 132013,China)
Abstract:
Keywords:Agrobacterium tumefaciens  chicken beta-defenfin Gallinacin-3  alfalfa  genetic transformation
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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