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猪圆环病毒2型Cap基因原核表达载体的构建及表达
引用本文:范兴球,刘成倩,易建中,于宗幸,李红,张倩,余科,章岭.猪圆环病毒2型Cap基因原核表达载体的构建及表达[J].上海农业学报,2014(1):49-53.
作者姓名:范兴球  刘成倩  易建中  于宗幸  李红  张倩  余科  章岭
摘    要:根据GenBank上已发表的PCV2的衣壳蛋白(Cap蛋白)基因设计1对引物,利用PCR方法从已知PCV2病毒中扩增到l条DNA片段,将PCR产物克隆至pMD18-T载体上获得稳定质粒,酶切及测序鉴定后,获得大小为578 bp的Cap基因序列,将该基因插入表达载体pET-30a质粒中,获得重组质粒pET-30a-PCV2-Cap,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。重组质粒pET-30a-PCV2-Cap经IPTG诱导后表达的重组蛋白分子量为28.0kD,经破碎后SDS-PAGE电泳分析表明该蛋白具有可溶性。Western blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。

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