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H9N2亚型AIV NS1基因的克隆及其在杆状病毒系统的表达
引用本文:詹爱军,王新卫,徐峥,谭婉明,陈靳松,毕英佐,于康振.H9N2亚型AIV NS1基因的克隆及其在杆状病毒系统的表达[J].西北农业学报,2008,17(2):38-42.
作者姓名:詹爱军  王新卫  徐峥  谭婉明  陈靳松  毕英佐  于康振
作者单位:1. 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
2. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
3. 华南农业大学动物科学学院,广州,510642
4. 中国兽药监察所,北京,100081
摘    要:应用DNAStar软件,参照Genbank中注册的AIV H9亚型毒株NS1基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H9亚型AIV的NS1基因,通过BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切位点将NS1基因插入转移质粒载体pFastbacHTa中,获得重组转移载体pFastbacHTa-H9NS1并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H9NS1,再将其转染昆虫细胞sf9,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经过SDS-PAGE和WesternBlot检测,H9 NS1基因在sf9细胞中得到了表达,H9 NS1大小约为28kD,而且表达的产物具有特异免疫学反应性。

关 键 词:禽流感病毒  非结构蛋白  杆状病毒表达  克隆
文章编号:1004-1389(2008)02-0038-05
收稿时间:2007/8/26 0:00:00
修稿时间:2007年8月26日

Molecular Cloning of Non-Structural Protein NS1 Gene of H9N2 Avian Influenza Virus(AIV) and Its Expression in Insect Cells
ZHAN Ai-jun,WANG Xin-wei,XU Zheng,TAN Wan-ming,CHEN Jin-song,BI Ying-zuo and YU Kang-zhen.Molecular Cloning of Non-Structural Protein NS1 Gene of H9N2 Avian Influenza Virus(AIV) and Its Expression in Insect Cells[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2008,17(2):38-42.
Authors:ZHAN Ai-jun  WANG Xin-wei  XU Zheng  TAN Wan-ming  CHEN Jin-song  BI Ying-zuo and YU Kang-zhen
Institution:College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhbu 510642, China;College of Animal Husbandry and Veterinary, He''nan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China;China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China;China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China;China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:Avian influenza virus  Non-structural protein  Baculovims expression  Cloning
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