| 兔源A型多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王锦祥,付环茹,孙世坤,陈冬金,高承芳,桑雷,谢喜平.兔源A型多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立[J].福建畜牧兽医,2023(5):20-23. |
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| 作者姓名： | 王锦祥 付环茹 孙世坤 陈冬金 高承芳 桑雷 谢喜平 |
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| 作者单位： | 1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所;2. 福建省畜禽遗传重点实验室 |
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| 基金项目： | 福建省科技计划公益类专项（2022R10260012）；;国家兔产业技术体系（CARS-43-G-5）资助； |
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| 摘 要： | 为建立一种特异性强且敏感性高的兔源A型多杀性巴氏杆菌快速检测方法，本研究以兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1和hyaD基因为目的基因，设计2对特异性引物进行双重PCR扩增，经反应条件优化，建立检测兔源A型多杀性巴氏杆菌的双重PCR方法。该方法的最佳退火温度为57.8℃，最佳混合引物浓度为0.8μmol/L。该方法特异性强，对兔源A型多杀性巴氏杆菌为kmt1和hyaD基因双阳性，对兔源D型和F型多杀性巴氏杆菌为kmt1基因单阳性，对兔源其它细菌性病原和阴性对照则均为阴性。该方法敏感性高，对兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1和hyaD基因的最低检出限分别为1×103拷贝/μL和1×104拷贝/μL。该方法重复性好，且与已报道的多重PCR方法的符合率高达96.12%。本研究建立的双重PCR方法对兔源A型多杀性巴氏杆菌具有良好的特异性和敏感性，且重复性好、准确性高，为该病原的快速检测提供了有力的技术支持。
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| 关 键 词： | 兔 A型多杀性巴氏杆菌 kmt1基因 hyaD基因 双重PCR |
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