| 聚磷激酶基因克隆及其植物表达载体构建 |
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| 引用本文： | 曹访,杨志红,韩志萍,李慧慧,费佳玲.聚磷激酶基因克隆及其植物表达载体构建[J].江苏农业科学,2012,40(7):26-27. |
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| 作者姓名： | 曹访 杨志红 韩志萍 李慧慧 费佳玲 |
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| 作者单位： | 湖州师范学院,浙江湖州,313000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(编号:31070451);浙江省“151钱江人才”计划(编号:2009R10016);浙江省自然科学基金(编号:Y5110067) |
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| 摘 要： | 利用试剂盒法提取E.coli DH5α基因组DNA,根据GenBank中登录的大肠杆菌聚磷激酶(PPK)基因序列(L03719)设计引物,通过PCR扩增得PPK基因,然后将其克隆到pMD20-T Vector上并测序,测序结果与GenBank登录的序列相比对,同源性达99.9％.用限制性内切酶XbaⅠ、BamH Ⅰ将目的片段和植物表达载体pBI121进行双酶切,T4连接酶连接,然后转化到E.coli BL21感受态细胞,获重组植物表达载体pBI21-PPK,从而为研究转PPK基因植物的聚磷能力奠定基础.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 聚磷激酶 植物表达载体 |
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