| 家蚕Gloverin 2克隆、高效表达及其抗核型多角体病毒感染作用研究 |
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| 引用本文： | 唐芬芬,杨伟克,张祖芸,李娜,刘娜,谢昆.家蚕Gloverin 2克隆、高效表达及其抗核型多角体病毒感染作用研究[J].河南农业科学,2023(8):135-141. |
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| 作者姓名： | 唐芬芬 杨伟克 张祖芸 李娜 刘娜 谢昆 |
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| 作者单位： | 1. 红河学院生物科学与农学学院;2. 云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所 |
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| 基金项目： | 红河学院博士专项（BS2003）；;云南省教育厅科学研究基金项目（2022J0888）； |
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| 摘 要： | 为获得家蚕抗菌肽葛佬素2(BmGloverin 2)，并研究其在家蚕抗核型多角体病毒（BmNPV）感染过程中的作用，以经BmNPV诱导的3龄3日家蚕中肠cDNA为模板，根据GenBank上BmGloverin 2基因序列设计特异性引物，克隆出去除信号肽部分（1—18 aa）的BmGloverin 2基因，与表达载体pET-28a（+）连接构建pET28a(+)-BmGloverin 2，对含有pET28a(+)-BmGloverin 2重组质粒的菌株诱导表达，然后对抗菌肽重组蛋白进行Ni-IDA亲和层析、透析及浓缩过滤以获得高浓度目的蛋白；并采用抑菌试验检测BmGloverin 2重组蛋白生物活性；最后，将具有生物活性的BmGloverin 2重组蛋白和BmNPV混合处理4 h后喂食家蚕，并以直接喂食BmNPV和无菌水处理为对照组，以检测BmGloverin 2对BmNPV感染家蚕的影响。结果显示，成功克隆BmGloverin 2基因，并构建重组pET28a(+)-BmGloverin 2；在37℃、0.5 mmol/L IPTG条件下诱导表达可获得大量BmGloverin 2重组蛋白...
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| 关 键 词： | 家蚕 抗菌肽 Gloverin 表达 核型多角体病毒 抗病毒 |
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