| 表达RGD和MEL重组沙门氏菌的构建及其对B16细胞凋亡作用的研究 |
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| 引用本文： | 李昕,孟佳丽,尚翠玲,李丹,蓝肇煜,王小月,金天明.表达RGD和MEL重组沙门氏菌的构建及其对B16细胞凋亡作用的研究[J].中国预防兽医学报,2019(7):682-688. |
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| 作者姓名： | 李昕 孟佳丽 尚翠玲 李丹 蓝肇煜 王小月 金天明 |
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| 作者单位： | 天津农学院动物科学与动物医学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然基金项目(31572492);天津市科技计划项目(高端兽药先进制造科技重大专项)(17ZXGSNC00030);天津市农委农业科技示范推广项目(201601380) |
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| 摘 要： | 为研究融合表达肿瘤靶向肽(RGD)和蜂毒肽(MEL)双基因重组减毒沙门氏菌对小鼠黑色素瘤B16细胞的体外抑瘤作用,本实验将RGD-MEL基因片段克隆至pEGFP-N1载体,将重组载体导入减毒沙门氏菌LH430,构建了重组沙门氏菌LH430/pEGFP-RGD-MEL,经PCR技术、质粒双酶切鉴定后采用阳性重组菌株侵染体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞,提取细胞总RNA经反转录后采用PCR检测目的基因RGD-MEL转录情况,western blot检测目的蛋白RGD-MEL以及凋亡蛋白Caspase-3、Bcl2、Bax的表达;流式细胞术检测B16细胞凋亡情况。结果显示:导入RGD-MEL基因的减毒沙门氏菌LH430侵染B16细胞后,目的基因RGD-MEL高效表达;经重组菌株侵染的B16细胞凋亡蛋白Caspase-3、Bcl2、Bax表达水平均显著增高(p<0.05);重组沙门氏菌诱导B16细胞的凋亡作用较PBS组显著增强(p<0.05)。本研究为细胞穿膜肽和细菌联合治疗肿瘤提供实验支持,并为后续动物试验奠定了研究基础。
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| 关 键 词： | RGD基因 MEL基因 减毒沙门氏菌 黑色素瘤 细胞凋亡 |
Construction of a recombinant Salmonella typhimurium strain harboring co-expressed RGD and MEL genes and its effects on apoptosis of B16 cells |
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| LI Xin,MENG Jia-li,SHANG Cui-ling,LI Dan,LAN Zhao-yu,WANG Xiao-yue,JIN Tian-ming.Construction of a recombinant Salmonella typhimurium strain harboring co-expressed RGD and MEL genes and its effects on apoptosis of B16 cells[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(7):682-688. |
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| Authors: | LI Xin MENG Jia-li SHANG Cui-ling LI Dan LAN Zhao-yu WANG Xiao-yue JIN Tian-ming |
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| Institution: | (College of Animal science and animal medicine,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China) |
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| Abstract: | LI Xin;MENG Jia-li;SHANG Cui-ling;LI Dan;LAN Zhao-yu;WANG Xiao-yue;JIN Tian-ming(College of Animal science and animal medicine,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China) |
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| Keywords: | RGD gene MEL gene attenuated Salmonella typhimurium melanoma apoptosis |
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