| 猪繁殖与呼吸综合征病毒与非典型瘟病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 冯宇,杨晓宇,赵军,李雨濛,徐志文,朱玲.猪繁殖与呼吸综合征病毒与非典型瘟病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2019(2):156-160. |
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| 作者姓名： | 冯宇 杨晓宇 赵军 李雨濛 徐志文 朱玲 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心;四川动物疫病与人类健康四川省重点实验室 |
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| 基金项目： | 四川省科技支撑计划(2017NZ0038);"十二五"农村领域国家科技计划课题(2015BAD12B04-2.3);十三五育种攻关计划(2016NYZ0052);国家农业产业技术体系四川兽药创新团队专项(CARS-SVDIP) |
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| 摘 要： | 为建立同时快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与非典型瘟病毒(APPV)两种病毒的方法,本研究根据GenBank中登录的PRRSV、APPV的基因序列,选取PRRSV的ORF2基因和APPV的NS2基因分别设计特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测PRRSV与APPV的双重RT-PCR方法。利用该方法对PRRSV、APPV重组质粒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒的cDNA和阴性对照进行检测,结果显示除PRRSV和APPV重组质粒扩增结果为阳性外,其余均为阴性,表明其特异性良好;该方法对APPV和PRRSV质粒标准品的最低检出量分别为2.17×10~4拷贝/μL、3.13×10~3拷贝/μL,敏感性较高;同时批间和批内重复性试验表明该方法重复性好。利用该方法对四川地区临床73份疑似仔猪颤抖病与猪繁殖与呼吸综合征病的病料样品进行检测,结果与单一RT-PCR的检测符合率为100%。本研究建立的双重RT-PCR方法具有良好的实用性,可用于临床样品的检测,对临床早期诊断具有重要意义。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 非典型瘟病毒 双重RT-PCR |
Establishment and application of a duplex RT-PCR for the detection of PRRSV and APPV |
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| FENG Yu,YANG Xiao-yu,ZHAO Jun,LI Yu-meng,XU Zhi-wen,ZHU Ling.Establishment and application of a duplex RT-PCR for the detection of PRRSV and APPV[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2019(2):156-160. |
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| Authors: | FENG Yu YANG Xiao-yu ZHAO Jun LI Yu-meng XU Zhi-wen ZHU Ling |
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| Institution: | (Animal Biotechnology Center,Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China;Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province,Chengdu 611130,China) |
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| Abstract: | FENG Yu;YANG Xiao-yu;ZHAO Jun;LI Yu-meng;XU Zhi-wen;ZHU Ling(Animal Biotechnology Center,Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China;Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province,Chengdu 611130,China) |
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| Keywords: | porcine reproductive respiratory syndrome atypical porcine pestiviruses duplex RT-PCR |
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